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當前位置:首頁  -  產品中心  -  PCR試劑盒  -  熒光-PCR法  -  48T禽腺病毒(FADV)核酸試劑盒說明書

禽腺病毒(FADV)核酸試劑盒說明書

產品簡介

里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸eIF6 (D16E9) XP® Rabbit mAb2-炔噻吩

DL-賴氨酸鹽酸鹽eIF6 (D16E9) XP® Rabbit mAb炔基溴化鎂

DL-正纈氨酸Phospho-PLD1 (Ser561) Antibody溴

更新時間:2021-03-13
訪問次數:1603
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 禽腺病毒(FADV)核酸試劑盒說明書

 規格

 48T

 貨號

 LZP7939

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
硝基-L-氨酸MST4 Antibody4,二甲基環己酮,98%

N-酰-DL-氨酸Phospho-APP (Thr668) Antibody6-尿嘧啶

N-酰-DL-谷氨酸AMPA Receptor 4 (GluA 4) (Ala60) Antibody羥基金剛烷

DL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸AMPA Receptor 4 (GluA 4) (Arg860) Antibody5-甲基-羥基吡啶

DL-半胱氨酸鹽酸鹽,一水TORC2/CRTC2 Antibody2-氨基-5-溴-6-甲基吡啶

DL-胱氨酸鹽酸鹽Phospho-PKM2 (Tyr105) Antibody2,5-噻吩二羧酸

DL-胱氨酸Forskolin溴-甲酸

DL-組氨酸FAAH1 (C84F1) Rabbit mAb6-溴正己

DL-組氨酸鹽酸鹽GPNMB (E4D7P) XP® Rabbit mAb溴-甲

DL-高氨酸Phospho-PLD1 (Thr147) Antibody2-氨基-甲氧基甲酸

DL-高絲氨酸PLD1 Antibody2,二氫-1H-喹啉-酮

克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸eIF6 (D16E9) XP® Rabbit mAb2-炔噻吩

DL-賴氨酸鹽酸鹽eIF6 (D16E9) XP® Rabbit mAb炔基溴化鎂

DL-正纈氨酸Phospho-PLD1 (Ser561) Antibody溴-1,1,1-三氟酮

DL-正纈氨酸GABA(B)R1 Antibody三(溴)

DL-焦谷氨酸EAAT2 Antibody4,6-二-5-硝基嘧啶

DL-叔亮氨酸GABA(B)R2 AntibodyN-甲基高哌

N-酰-DL-甲硫氨酸SNF2H (D4W6N) Rabbit mAbBROMO-2-METHOXYBENZALDEHYDE

補體AH50 ELISA試劑盒Alpha-Synuclein  核突觸蛋白-α100 ul

波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒Alpha-Synuclein  核突觸蛋白100 ul

酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒gamma Synuclein  核突觸蛋白-γ100 ul

二酸單酰輔酶A脫羧酶(MLYCD)ELISA試劑盒Syntaxin 1  突觸融合蛋白1100 ul

二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)ELISA試劑盒SYT3  突觸結合蛋白3100 ul

(MDA)ELISA試劑盒T3  *狀腺素T3100 ul

氨酸氨基轉移酶(ALT)ELISA試劑盒Synapsin I  神經突觸素120 ul

別孕酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)ELISA試劑盒phospho-Synapsin I (Ser553)  酸化神經突觸素1100 ul

表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒phospho-Synapsin I (Ser9)  酸化神經突觸素1100 ul
禽腺病毒(FADV)核酸試劑盒說明書血清白蛋白單克隆抗體Glycitin中文名:黃豆黃苷別名:分子式:C22H22O10

磷酸化絲狀肌動蛋白結合蛋白抗體GB-1a中文名:別名:(-)-GB-1a分子式:C30H22O10

AEG-1抗體Epimedin B中文名:朝藿定B別名:分子式:C38H48O19

肌動蛋白相關蛋白2/3亞型1A抗體α-Naphthoflavone中文名:α-萘黃酮別名:分子式:C19H12O2

錨蛋白重復結構域蛋白32抗體Epimedin C中文名:朝藿定C別名:分子式:C39H50O19

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