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蠶微粒子病PCR檢測試劑盒廠家

產品簡介

蠶微粒子病PCR檢測試劑盒廠家
上海聯祖生物相關產品:
CK-19檢測試劑盒2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

更新時間:2021-03-13
訪問次數:948
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 蠶微粒子病PCR檢測試劑盒廠家

 規格

 50T

 貨號

 LZP7510

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
DBPC2,2'-二硫二吡啶 98%乙偶姻 97%

o-Cresol二芐基硫 99%乙偶姻 分析標準品,單聚體

Guanidine hydrochloride2,5-二溴 98%乙偶姻 Natural,≥96%(GC), FCC

DPG2,5-二溴噻吩 96%丁酸正戊酯  99%

Guanidine carbonate4,4-二甲氧基-2-丁酮  95%丁酸正戊酯  ≥99%, Kosher

Isophorone4,4'-二氨基二苯硫 98%2,3-丁二酮 98%

Rotene3,4-二溴噻吩 97%2,3-丁二酮 standard for GC, ≥99.0% (GC)

Corticosterone2,5-二氯噻吩 98%2,3-丁二酮 分析標準品,≥99.0% (GC)

MBTH Hydrochloride2,4-二氟苯硫酚 97%2,3-丁二酮 Natural,≥99%, FCC

PVPP3,4-二氟苯硫酚 96%正丁  >99.5%(GC)

1,3-Dihydroxyacetone dimmer2,3-二氯苯硫酚 97%正丁  ACS, ≥99.4%

4-Amiantipyrine2,4-二氯苯硫酚 97%乙酸丁酯 ≥99%, FCC

Cyclohexane2,5-二氯苯硫酚 98%乙酸丁酯 natural, ≥98%, FCC

Acetophene3,5-二氯苯硫酚 97%乙酸桂酯  97%

3'-Amiacetophene2,4-二硫酚 95%乙酸桂酯  ≥98%, FCC

Benzanthrone2,5-二硫酚 98%桂酸桂酯  ≥98%,Kosher

喹硫磷(分析標準品,99.8%)p27 Kip1 (SX53G8.5) Mouse mAbLpin1 protein  Lpin1 抗體

二氯喹啉酸(分析標準品,98%)p27 Kip1 (SX53G8.5) Mouse mAbLPAP  淋巴細胞磷蛋白磷酸酶相關蛋白抗體

苯基三氯化錫(標準品)MyD88 AntibodyLOXL4  賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體

標準溶液(100μg/ml,u=4%)β-Actin (8H10D10) Mouse mAbLOXL2  賴氨酰氧化酶相關蛋白2抗體

標準溶液(10μg/ml,u=6%)β-Actin (8H10D10) Mouse mAbLOX-1/OLR1  凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體

標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)TRAIL (C92B9) Rabbit mAb (PE Conjugate)LONP1  線粒體離子肽酶1抗體

威標準溶液(10μg/ml,u=4%)GRB10 Antibodyl-Myc  Myc基因肺癌相關蛋白抗體

吡嘧磺隆(分析標準品,99%)Phospho-SHP-2 (Tyr580) AntibodyLMW Kinigen/Kinigen 1  低分子量生長促進因子抗體(激肽原1)

草胺(分析標準品,97.5%)ZO-3 (D57G7) XP® Rabbit mAbLMP7  低分子量蛋白酶體7抗體

草胺標準溶液(10μg/ml,u=2%)ZO-3 (D57G7) XP® Rabbit mAbLMP7  低分子量蛋白7抗體
蠶微粒子病PCR檢測試劑盒廠家內吞作用輔助蛋白EPN2抗體(S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidine中文名:(S)-(+)-4-芐基-3-丙酰-2-惡唑烷酮別名:分子式:C13H153

內質網定位蛋白ERGI3抗體5-Benzyl D-glutamate中文名:D-谷氨酸5-苯甲酯別名:分子式:C12H154

內質網氧化物蛋白Ero1-Lα抗體(R)-(-)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidine中文名:(R)-(-)-4-芐基-3-丙酰基-2-惡唑烷酮別名:分子式:C13H153

內質網蛋白ERp19抗體N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester中文名:N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯別名:分子式:C18H194

內質網蛋白ERp72抗體9-(1H-Benzotriazol-1-ylmethyl)-9H-carbazole中文名:9-(1H-苯并三唑-1-基甲基)-9H-咔唑別名:分子式:C19H14N4

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