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辛德畢斯病毒PCR檢測試劑盒規格

產品簡介

辛德畢斯病毒PCR檢測試劑盒規格
上海聯祖生物相關產品:
HTLV-Ⅰ檢測試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

更新時間:2021-03-13
訪問次數:583
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 辛德畢斯病毒PCR檢測試劑盒規格

 英文名稱

 Sindbis Virus(SINV)RTPCR

 貨號

 LZP7304

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
4,9,9’-Trihydroxy-3,3’-dimethoxy-8,4’-oxyneolignanD-亮氨酸甲酯鹽酸鹽 98%絡塞維 分析標準品,≥98%

4’,9,9’-Trihydroxy-3’-methoxy-3,7’-epoxy-4,8’-oxyneolignanD-叔亮氨酸鹽酸鹽 BR 竹節香附素A 分析標準品,≥98%

4-Acetoxycinnamic acidDL-賴氨酸鹽酸鹽 BR遠志皂苷元 分析標準品,≥99%

4-AllylpyrocatecholN-甲基-L-脯氨酸,一 98%番瀉葉苷A 分析標準品,≥96%

4-Chlorocinnamic acidD-蘋果酸 99%甜菊苷 80%

4-HydroxycinnamamideDL-正纈氨酸 99%甜菊苷 分析標準品,≥98% (HPLC), 固體

4-MethoxycinnamaldehydeD-正纈氨酸 99%柴胡皂苷D 分析標準品,≥98%

4-Methoxycinnamic acidL-正纈氨酸 99%槐果堿  分析標準品,≥98%

4-Methylcinnamic acidD-苯氨酸甲酯鹽酸鹽 98%柴胡皂苷 B 分析標準品,≥98%

4-Nitrocinnamic acidD-苯甘氨酸乙酯鹽酸鹽 99%絞股藍皂苷 分析標準品,UV≥98%

4-O-Feruloylquinic acidDL-脯氨酸 99%梭砂貝母堿 分析標準品,≥98%

6-O-CaffeoylarbutinL-焦谷氨酸 97%亞麻木酚素 分析標準品,≥98%

6-O-FeruloylglucoseL-脯氨 97%可可堿 分析標準品,≥99%

9’-Methyl lithospermate BD-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽 96% 分析標準品,≥99%

ActeosideL-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽 98%鳶尾黃素 分析標準品,≥98%

AnetholeL-高脯氨酸 98%花旗松素 分析標準品,≥98%

五氧(>99%,BR)CD2AP Antibodyphospho-IKKi/IKKe(Thr500)  磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體

過硫酸銨ATGL Antibodyphospho-IKKi/IKKe(Ser172)  磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體

甲亞胺鹽(>95%,BR)LSD1 Antibodyphospho-IKK gamma(Ser43)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體

天青C(>50%,BS)Rictor Antibodyphospho-IKK gamma (Ser85)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體

氯酸鋇一(>99%,BR)TANK Antibodyphospho-IKK gamma (Ser376)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體

硫酸鋇(>98%,BR)Rab5 Antibodyphospho-IKK gamma (Ser31)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體

硫化鋇(>98%,BR)Rab5 Antibodyphospho-IKK beta(Tyr199)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體

苯磺酸(>98%,BR)α-Tubulin Antibodyphospho-IKK beta(Tyr188)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體

安息香(>98%,BR)NSF Antibodyphospho-IKK beta(Ser740)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體

安息香乙(>98%,BR)β-Tubulin Antibodyphospho-IKK beta(Ser733)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體
辛德畢斯病毒PCR檢測試劑盒規格小鼠嗜環蛋白/親環素A(CyPA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8°C25克

小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

小鼠通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

小鼠通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

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