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奈瑟菌通用PCR檢測試劑盒規格

產品簡介

奈瑟菌通用PCR檢測試劑盒規格
上海聯祖生物相關產品:
NNE檢測試劑盒細胞固定后可能導致熒光的淬滅,請不要固定樣品。

更新時間:2021-03-13
訪問次數:939
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 奈瑟菌通用PCR檢測試劑盒規格

 英文名稱

 Neisseria spp.PCR

 貨號

 LZP7052

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Gly-lleu人視網膜微血管內皮細胞*培養基2-苯甲酰苯甲酸甲酯 98%

Gly-Vlu人角膜成纖維細胞*培養基對甲氧基苯甲酸 98%

Gly-Gly-Len人小梁網細胞*培養基尼泊金甲酯 分析標準品,99.5%

Gly-Gly-Gly人視網膜muller細胞*培養基對羥基苯甲酸酯鈉 USP,Ph Eur

Glycylglycyl-L-isoleucine人角膜內皮細胞*培養基對羥基苯甲酸酯 CP,98%

Gly-Gly-Val人脈絡膜微血管細胞*培養基肉桂 98%

Taurine人牙周膜成纖維細胞*培養基肉桂 98%

Camsylate大鼠肺微血管內皮細胞*培養基甲酯 99%

L(-)-Camphorsulfonic acid大鼠肺血管平滑肌細胞*培養基苯甲酰胺 99%

Camphore大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養基苯甲酰胺 99.5%,升華純化

Sarcosine大鼠氣管上皮細胞*培養基碳酰肼 97%

Glycine大鼠氣管平滑肌細胞*培養基2,4-二氯-5-硝基嘧啶 97%

BOC-Glycine大鼠肺成纖維細胞*培養基N-乙酰基吲哚酮 97%

Hippuric Acid大鼠支氣管上皮細胞*培養基1-辛炔-3- 97%

Hippuryl-L-phenylalanine大鼠支氣管成纖維細胞*培養基1H-吡唑-4-甲酸 98%

Glycylglycine大鼠肺大靜脈平滑肌細胞*培養基2-乙酰吡啶 98%

鹽酸多奈哌齊III型(標準品)SHP2 peptide  蛋白酪氨酸磷酸酶2抗原TBL1Y  轉導β樣蛋白1抗體

達馬莫德SIP1 peptide  運動神經元存活蛋白結合蛋白1抗原TBL1X  轉導素β1X連鎖蛋白抗體

鹽酸多佐胺;鹽酸杜塞酰胺SIRT1(sirtuin 1)  沉默調節蛋白1抗原TBCD4/TBC1D4  TBC結構域TBCD4蛋白抗體

鹽酸多佐胺;鹽酸杜塞酰胺(標準品)Skp2 peptide  細胞S相激酶相關蛋白抗原TBCD/Beta tubulin cofactor D  微管蛋白β輔助因子D抗體

甲磺酸多沙唑SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicarbonate cotransporter NBC1)  碳酸氫鈉協同轉運蛋白4-A4Tau protein  微管相關蛋白抗體

甲磺酸多沙唑(標準品)Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7)  碳酸氫鈉協同轉運蛋白4-A7抗原Tau protein  微管相關蛋白抗體

鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase)  線粒體促凋亡蛋白抗原Tat  細胞酪氨酸轉氨酶抗體

鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素(標準品)SLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1)  乙酰輔酶A轉運蛋白1抗原TASK 3/KCNK9  酸敏感性離子通道蛋白抗體

鹽酸強力霉素/鹽酸多西環素SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2)  磷酸鈉協同轉運蛋白抗原TAS2R7/T2R6  味覺感受器蛋白T2R6抗體

鹽酸強力霉素/鹽酸多西環素(標準品)SMN1(survival of motor neuron 1)  運動神經元生存蛋白1抗原TAPA1/CD81  CD81抗體
奈瑟菌通用PCR檢測試劑盒規格人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1000支/盒

人成骨生長肽(OGP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃100毫克

人成熟促進因子(MPF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人遲現抗原4(VLA4)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人垂草扁桃酸(VMA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10000U

人垂體腺苷酸環化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃2000U

人雌二醇(E2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:250毫克

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