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當前位置:首頁  -  技術文章  -  紅色毛癬菌LAMP試劑盒反應五要素

紅色毛癬菌LAMP試劑盒反應五要素

更新時間:2022-10-12點擊次數:1411

紅色毛癬菌LAMP試劑盒反應五要素:


參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


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引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:


①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。


②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。


③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

     

④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。


⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。


⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。


⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。


引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白

重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)

重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)

重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽)

重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽)

重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽)

重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)

重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標簽)

重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)

重組狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)

重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標簽)

重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (Fc 標簽)

重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (Fc 標簽)

重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標簽)

重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)

重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)

重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標簽)




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